至中科大科学家建立起一套稳定的单细胞质谱分析技术
2022年11月17日
近日，中科大科学家展开了1项科学研究，此研究通过对脑区单个神经元内的数千种化学小份子进行了快速质谱检测，成功建立了1套稳定的单细胞质谱分析技术。
近日，PNAS上1发表了来自中科大科学家的1项研究，该研究对小鼠海马、前额叶、杏仁核、纹状体等脑区单个神经元内的数千种化学小份子进行了快速质谱检测，并且可以做到同步收集电生理信号，在单细胞层次上成功地完成了对神经元功能、代谢物组成及其代谢通路的研究。
近日，国际综合研究期刊《美国国家科学院院报》(PNAS)发表了题为《Single-Neuron Identification Of Chemical Constituents, Physiological Changes, And Metabolism Using Mass Spectrometry》的研究论文。该研究由中国科学技术大学生命学院神经退行性疾病研究中心暨中国科学技术大学脑资源库熊伟教授研究组与中科大化学学院黄光明教授研究组合作完成。该研究依托电生理膜片钳和电喷雾离子源技术建立的稳定的单神经元胞内组分取样和质谱组分分析技术，对小鼠海马、前额叶、杏仁核、纹状体等脑区单个神经元内的数千种化学小份子进行了快速质谱检测，并且可以做到同步收集电生理信号，在单细胞层次上成功地完成了对神经元功能、代谢物组成及其代谢通路的研究。这项研究首次利用化学质谱方法直接无稀释的检测单个神经元中多种神经递质、代谢物、脂质等化学小份子，实现了单个神经元化学成份及代谢物的即时分析，该技术将目前神经细胞成份分析的研究推向了1个活细胞及单细胞水平，有望在单细胞层次上去研究神经生物学、代谢组学、毒理学等生命科学的重大问题，具有非常重要的利用前景。
大脑中有亿万个神经细胞，这些神经细胞在细胞形态，突触连结，细胞结构，电生理和生理功能上具有高度的多样性。不同种类的神经细胞中，其化学份子组成、含量、代谢也都有着很大的差别。因此，对脑内单个神经元的化学成份进行分析，则具有重要的生物学价值。质谱分析由于具有高灵敏度，大的线性范围和高通量分析化学份子的特点，逐步被用于单细胞的细胞代谢分析。但目前的方法需要使用大量有机试剂对细胞进行处理，没法保持采样时细胞的活性;冗杂的处理和分离进程也致使较慢的分析速度，没法短时间内完成大量单细胞而且分析;并缺少来自同1细胞的电生理信号;终致使单细胞代谢物的质谱分析没法大范围用于神经细胞的分析。
此研究成功建立了1套稳定的单细胞质谱分析技术，并对不同年龄段的小鼠海马、杏仁核、纹状体等脑区单个神经元中的谷氨酰胺、谷氨酸和GABA等化学小份子进行定性、定量分析并对其进行神经元分类，后利用该技术成功鉴订单个神经元内谷氨酰胺的代谢路径。这项方法的成熟与普及，必会为后续单个神经元组分分析、神经元分类和病理状态下单个神经元中组分变化分析提供强有力的手段。
该项工作由中科大生命学院博士后朱洪影、生命学院博士研究生邹桂昌、王宁在熊伟教授和黄光明教授的共同指点下完成。该研究工作得到了国家自然科学基金委重大研究计划、科技部、中科院战略性先导科技专项(B类)和国家青年千人计划等的资助。该工作还得到中国科学技术大学同步辐射实验室光电离质谱线站的仪器与技术支持。
编辑点评
中国科大科学家通过对小将在全球范围内提高塑料利用的大部份添加剂产品的价格鼠海马、前额叶、杏仁核、纹状体等脑区单个神经元(签约仪式)内的数千种化学小份子进行了快速质谱检测，并且可以做到同步收集电生理信号，在单细胞层次上成功地完成了对神经元功能、代谢物组成及其代谢通路的研究，也建立了1套稳定的单细胞质谱分析技术。